GMP級干細(xì)胞細(xì)胞凍存液 Cryopreservation Media

產(chǎn)品描述：

STEM-CELLBANKER ®是GMP下生產(chǎn)的ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞凍存液 產(chǎn)品特點(diǎn)是化學(xué)成分清晰，無動(dòng)物源成分，專門針對ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞特點(diǎn)設(shè)計(jì)的細(xì)胞凍存液。STEM-CELLBANKER ®是*無血清和動(dòng)物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求，是干細(xì)胞治療和應(yīng)用合適的細(xì)胞凍存液，STEM-CELLBANKER ®使用方便，不需要特殊設(shè)備和儀器就可以實(shí)現(xiàn)干細(xì)胞高存活率的凍存和長達(dá)10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ®還顯著增加細(xì)胞活力，同時(shí)保持細(xì)胞多能性，和細(xì)胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達(dá)到的。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1）化學(xué)成分清楚和無動(dòng)物源成分

2）按照日本，歐盟，美國和PIC/SGMP指南生產(chǎn)

3）復(fù)蘇后保持細(xì)胞的高活力

4）解凍復(fù)蘇后依然保持干細(xì)胞的多能性

5）實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的長期凍存，不管是-80度還是液氮保存都可以保證活性10年以上

6）可以不需要液氮就可以長期保存

7）同樣可以適合組織冷凍保存及其他珍貴細(xì)胞凍存

8）STEM-CELLBANKER 已經(jīng)得到美國食品藥物管理局的認(rèn)證（生物制品評價(jià)和研究中心）

STEM-CELLBANKER ®是*無血清和動(dòng)物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求，是干細(xì)胞治療和應(yīng)用合適的細(xì)胞凍存液，STEM-CELLBANKER ®使用方便，不需要特殊設(shè)備和儀器就可以實(shí)現(xiàn)干細(xì)胞高存活率的凍存和長達(dá)10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ®還顯著增加細(xì)胞活力，同時(shí)保持細(xì)胞多能性，和細(xì)胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達(dá)到的。

應(yīng)用實(shí)例：

圖1 STEM-CELLBANKER對人體胚胎干細(xì)胞（hESC） 和誘導(dǎo)多能（iPS）干細(xì)胞進(jìn)行凍存測試

測試凍存液：STEM-CELLBANKER凍存液 vs 常規(guī)細(xì)胞凍存液（細(xì)胞培養(yǎng)基 + 10% DMSO + 血清代替品）

細(xì)胞存活率評估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit試劑盒

測試結(jié)果：使用STEM-CELLBANKER凍存液的細(xì)胞存活率明顯提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分別高達(dá)９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常規(guī)細(xì)胞凍存液高一倍。同時(shí)，結(jié)果也顯示STEM-CELLBANKER凍存液沒有給細(xì)胞的增殖、分化和染色體組形帶來影響。

圖2.將小鼠腎臟切碎成約5平方毫米。將組織樣品或者立即固定用10％福爾馬林或冷凍保存與在-801毫升STEM-CELLBANKER的ø C一周。冷凍保存的樣品在解凍后立即用10％福爾馬林固定。兩種樣品的石蠟切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗體染色。在新鮮和冷凍保存的組織樣品中，壞死或細(xì)胞凋亡的跡象都可以忽略不計(jì)。在來自各種小鼠器官的組織樣品的情況下獲得了類似的結(jié)果。

圖3.總RNA從小鼠肺成纖維細(xì)胞系的任收獲后立即或在-80與STEM-CELLBANKER凍存后的細(xì)胞中提取ø C一周和解凍。通過DNA微陣列分析比較兩個(gè)樣品中的mRNA水平，結(jié)果顯示93％的mRNA在±1.6倍差異的范圍內(nèi)。

細(xì)胞株：129SV (Mouse ES cell)

測試凍存液：ZENOAQ 產(chǎn)品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）

常規(guī)自培凍存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程圖：

使用手冊:

細(xì)胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對數(shù)生長數(shù)的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。

1. 按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。

2. 按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。

（參考：5×10⁵ 至 5×10⁶ cells/ml）。

3. 取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去離心管中的上清液。

4. 加入適量的CELLBANKER? 細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為 5×105 至 5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液。

5. 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示*的冷凍保存管中。

6. 直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

7. 若研究者需要液氮保存時(shí)，可將*凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：

1. 從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃ 振動(dòng)水浴槽中快速解凍。

2. 待凍存管中細(xì)胞混合液*融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。

3. 離心收集培養(yǎng)細(xì)胞((參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4. 清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。

5. 加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。

6. 鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

儲存方法和保質(zhì)期

儲存于４℃以下。 保質(zhì)期３年。3個(gè)月以上沒有使用CELLBANKER凍存液的計(jì)劃時(shí)，盡可冷凍保存。為避免重復(fù)凍結(jié)-解凍過程可能導(dǎo)致的CELLBANKER品質(zhì)下降和性能降低，推薦將 100mL 產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱凍存。

質(zhì)量保障承諾

1. STEM-CELLBANKER 細(xì)胞凍存液經(jīng)過嚴(yán)格內(nèi)毒素、pH、滲透壓和微生物檢查，確保產(chǎn)品不含細(xì)菌、霉菌以及支原體。

2. 使用小鼠胚胎干細(xì)胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007細(xì)胞驗(yàn)證性能測試凍存細(xì)保存活率達(dá)8０％以上。

注意事項(xiàng)

1) CELLBANKER系列產(chǎn)品只供實(shí)驗(yàn)室研究使用，是試劑級產(chǎn)品。

2)我們推薦用戶在使用本產(chǎn)品之前，事先對所使用的細(xì)胞進(jìn)行至少為期 1 周的

試驗(yàn)性細(xì)胞冷凍保存培養(yǎng)。確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。

免責(zé)聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時(shí)所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)。

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